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9N 2.0 DNA连接酶

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
D3003A 9N 2.0 DNA连接酶 2000U 400
D3003B 20KU 3,000
9N 2.0 DNA连接酶(又名9oN DNA Ligase)能够催化磷酸二酯键的形成,使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5´-磷酸末端和3´-羟基末端通过磷酸二酯键相连。该酶来源于极度耐热的海底超嗜热古菌(Thermococcus sp.)9°N 菌株中克隆的连接酶基因,在 45℃-90℃ 范围内均有活性。该酶进一步经基因工程基因突变,使得耐受更高的温度,在90℃孵育15min仍然保留50%以上的活性,因此其适用于:(1)高温条件下,连接DNA链上的切刻位点;(2)与 PCR 反应条件兼容可用连接酶检测反应;(2)连接酶链式反应,对等位基因进行特异性检测。

组分

组分名称 数量
9N 2.0 DNA Ligase (40 U/μl) 50μl
10×9N DNA Ligase Buffer 250μl

应用

  • 高温条件下,连接DNA链上的切刻位点
  • 与 PCR 反应条件兼容可用连接酶检测反应
  • 连接酶链式反应,对等位基因进行特异性检测
  • 活性定义

    1 单位指 50μl 反应体系中,45℃ 条件下,15 分钟内能使 50% 的1μg 经 BstEII 消化的 λDNA 片段(12 bp 粘性末端)发生连接所需要的酶量。

    储存

    -20℃可保存两年,长期储存请置于-70℃。

    1× 9N DNA Ligase 反应缓冲液

    10 mM Tris-HCl,600μM ATP,2.5 mM MgCl2,2.5 mM DTT,0.1% Triton X-100(pH 7.5 @ 25℃),45℃ 温育。