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Rnase Free DNase I

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
D3001 Rnase Free DNase I(with Rnase Inhibitor) 1000U 300 Dnase I说明书
10KU 2,000
Rnase Free DNase I是将单链或双链 DNA 同等程度的随机分解,生成具有 5′-P 末端寡核苷酸的脱氧核糖核酸内切酶。由于RNase-free DNase I中Protease已几乎被完全去除,从而提高了该酶在 pH 中性区域的稳定性。此外Rnase Free DNase I中添加了Rnase Inhibitor,用于抑制RNA样品中残留的RNase核酸酶,因此可以有效抑制RNA提取过程中Rnase酶对RNA的降解。Stop Buffer终止反应后,可通过一步加热失活DNase I活性。

单位定义

以小牛胸腺 DNA 为底物,在 25℃、pH5.0 的条件下,1 分钟内使反应液的 260 nm 吸光度增加 0.001 所需要的酶量定义为 1 个活性单位(Kunitz Unit)。

组分

名称 数量
*Rnase Free DNase I (10 U/μl) 100μl
10×RD Buffer 500μl
10× RD Stop Buffer 500μl

*Rnase Free DNase I (10 U/μl)中含有20U/μl的Rnase Inhibitor,故进行消化试验时不需要再额外添加Rnase Inhibitor。

纯度

10 U的本酶和1μg的16S, 23S rRNA在37℃、pH7.5的条件下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化

储存

置于-20°C,可保存3年。

使用注意事项

1)通常加热方法即可失活DNase I。如需要去除残留的变性蛋白,可在37°C消化完毕后使用酚氯仿抽提并沉淀RNA样品(不进行加热操作)。
2)10× RD Stop Buffer中含有螯合剂用于去除二价阳离子,进行加热失活前,必须加入5 μl 10× RD Stop Buffer并混合均匀,再进行热失活,否则会导致RNA降解。
3)处理完毕的RNA样品进行一步反转录反应时,添加量需要<20%(如20μl的反转录体系中加入量要<4μl)