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Tli(exo-) DNA聚合酶

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
A1701A Tli (exo-) DNA聚合酶 250U 200
A1701B 2,500U 1,500

Tli (exo-) DNA聚合酶,又名Vent (exo-) DNA 聚合酶,来源于Thermococcus litoralis,经基因工程改造而得,去除了3´-5´核酸外切酶校读活性,其保真度有所降低,大约比Taq DNA聚合酶高2倍。该酶在95℃温育1小时后,仍具有90%以上的聚合酶活性。Tli (exo-) DNA Polymerase 与Vent (exo-) DNA Polymerase性质和使用方法完全相同,纯化自重组E. coli菌株,其携带D141A/E143A突变。

主要特征和应用

  • 引物延伸
  • 高温环状测序
  • 高温双脱氧测序

组分

组分名称 数量
Tli (exo-) DNA Polymerase (5 U/μl) 50 μl/500 μl
10×HG PCR Buffer 1 1 ml/5 ml

单位定义

一个活力单位即在在74°C条件下,30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

储存

-20℃可保存3年。

使用方法

按下表配制反应液:
Tli (exo-) DNA Polymerase(5 U/μl)             0.25 μl
10×HG PCR Buffer 1                                       5 μl
dNTP Mixture (2.5 mM each)                         4 μl
*1模板DNA                                                   *X μl
上游引物(10 μM)                                       2 μl
下游引物(10 μM)                                       2 μl
ddH2O                                                Up to 50 μl
*1模板DNA用量参数(50 μl反应体系):Genomic DNA 100-1000 ng ; Plasmid DNA 5-30 ng ; cDNA from RT reaction 1-5 μl
PCR扩增循环参数 
循环数 温度 时间
1st Cycle 95°C 2min
25-35 Cycles 95°C 10s
Tm 20s
72°C 2kb/min
Last Cycle 72°C 2min