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非洲猪瘟恒温扩增试剂盒(LAMP-HNB法)

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
A380901 非洲猪瘟LAMP-HNB变色扩增试剂盒 50T 1750
A381001 非洲猪瘟LAMP橙绿变色扩增试剂盒 48T 1750
A381101 非洲猪瘟LAMP浊度扩增试剂盒 50T 1750
LAMP是一种新型核酸扩增技术,采用4或6条能够识别目的基因上的6个特异区域的引物,依赖于Bst DNA聚合酶的强链置换活性,在30~60分钟内DNA扩增可达109~1010倍。 LAMP检测方法分为多种,包括染料法、浊度法、电泳法以及我司最新开发的TaqMan荧光探针法。我司推出基于LAMP常用检测方法的冻干LAMP检测通用试剂盒,该系列产品为冻干制品,相对于市面上的液体型产品更加稳定,灵敏度更高,操作更加方便,通常在30min内完成检测。
LAMP变色扩增试剂盒包括:冻干LAMP-HNB变色扩增试剂盒、冻干LAMP橙绿变色扩增试剂盒、冻干LAMP浊度扩增试剂盒和冻干LAMP-TaqMan扩增试剂盒。其中 羟基萘酚蓝(HNB)是一种金属离子指示剂,HNB与镁离子结合使得反应体系初始颜色为紫罗兰色,随着反应的进行,Mg2+与析出的焦磷酸根离子反应生成焦磷酸镁沉淀,羟基萘酚蓝失去了镁离子使得体系颜色变为天蓝色,而未反应的体系则仍保持着紫罗兰色 ;而橙绿变色染料(OG Dye)则可与LAMP扩增产物结合成明显的肉眼可见的荧光绿色,阴性反应则为橙色;浊度法则是由浊度仪检测或肉眼观察LAMP剧烈反应产生的焦磷酸镁沉淀而判断反应结果;而LAMP-TaqMan则是由荧光检测仪器实时分析反应而判读结果。

LAMP方法比较

  LAMP TaqMan LAMP-橙绿变色 LAMP-HNB LAMP-浊度
变色现象 荧光探针切割 橙色变绿色 紫罗兰色变天蓝色 无色变白色浑浊
检测设备 定量PCR仪或恒温荧光检测仪 肉眼可见 肉眼可见 肉眼可见或浊度仪
区分度 极易判读 极易判读 可以判读 相对不明显
灵敏度 单Copy 10Copy 10-50Copy 10-100拷贝
特异性 高特异 比较特异 一般 一般
反应温度 60~63℃ 60~65℃ 60~65℃ 60~65℃
反应时间 15~25min 20~40min 20~40min 20~40min
反应用酶 Bst5.0 Bst4.0 Bst4.0 Bst4.0
综合推荐 ★★★★★ ★★★★★ ★★★ ★★
试剂开发难度 较易 较难 非常难 较难
LAMP扩增试剂盒

储存

所有制品为冻干形式,在未溶解前,该制品可-20℃长期保存,并可室温运输,性能无下降。使用LAMP Buffer溶解后,可立即使用,剩余试剂可在-20℃保存1个月,在-60℃以下长期保存。

实例

以检测非洲猪瘟病毒(ASFV)为例,以标准质粒为模板,分别用橙绿变色、HNB显色和浊度方法检测,结果如下图。

LAMP扩增试剂盒

LAMP引物设计与实验指南
**本公司免费为客户设计LAMP引物,需要设计引物者请来信咨询,Email:info@haigene.cn.

注意事项

(1). 为了减少交叉污染,请分区操作(试剂和模板DNA的配置操作最好在不同区域中进行)。
(2). 实验时,所需模板量取决与样品类型(0.1 ng~100 ng),可先进行预实验确定模板量。
(3). 各区物品均为专用,不可交叉使用,防止污染。
(4). 实验过程中应穿工作服,带手套,建议使用带滤芯的一次性吸嘴。

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