产品编号 |
产品名称 |
规格 |
价格(元) |
说明书 |
D2703 |
T4 RNA 连接酶1 |
1,000U |
400 |
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D2703 |
10KU |
3,000 |
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T4 RNA 连接酶1催化3’→5’磷酸二酯键的形成,使核苷酸的5’-磷酸末端和3’-羟基末端连接,伴随着ATP水解为AMP和PPi。T4 RNA 连接酶1的作用底物包括单链RNA、DNA及二核苷焦磷酸,它可催化ssDNA和RNA的连接,相对于ssDNA,该酶对RNA分子的连接和环化效率更高。 |
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组分
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组分名称 |
数量 |
T4 RNA Ligase1 (10 U/μl) |
100μl |
10×T4 RNA Ligase Buffer |
250μl |
10mM ATP |
100μl |
50% PEG 8000 |
500μl |
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应用
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- 连接单链RNA和DNA
- RNA 3’末端标记
- RNA和DNA分子内和分子间连接
- 合成单链寡脱氧核苷酸
- 蛋白质中掺入非天然氨基酸
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活性定义
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1单位指在1×T4 RNA Ligase Buffer 中,37℃条件下,30分钟内将1nmol的5’-[32P]rA16转化为磷酸盐不溶物质所需要的酶量。 |
储存
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-20℃可保存3年。 |
使用注意事项
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1.1× T4 RNA Ligase Buffer:50mM Tris-HCl pH 7.5,10mM MgCl2,1mM DTT。该酶反应时需要加入终浓度1mM ATP。
2. 最佳反应温度37℃,65℃ 10min可使该酶失活。
3. 该酶的连接底物无论是ssDNA还是ssRNA均需要5’-磷酸化或预腺苷化。
4. 该酶不能连接双链DNA或RNA。
5. 加入终浓度5~10% PEG 8000或增加孵育时间可提高连接效率。 |