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牛痘病毒-拓扑异构酶(Topoisomerase I )

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
C5013A 牛痘病毒-拓扑异构酶(Topoisomerase I ) 500U 500
C5013B 5KU 3,500
Topoisomerase I 来源于牛痘病毒(vaccinia virus),通过基因重组方案制备纯化。其能解旋DNA的超螺旋结构,除此外其能识别并切割双链DNA末端 [5’C(T)CCTT↓],并且与DNA形成共价连接形成稳定复合物。该共价复合物遇到DNA的5’-OH基团后,重新连接形成完整DNA链。因此,使用Topoisomerase I 酶可作为DNA的连接有效工具。其可用于DNA的载体连接、缺刻修复、接头连接等实验。

组分

组分名称 数量
vaccinia Topoisomerase I (20 U/μl) 25 μl/250 μl
10×vaccinia TOPOI Buffer 1 ml

应用

  • DNA-载体连接
  • 缺刻修复
  • 接头连接

活性定义

1单位指在37℃条件下,1h内使1μg超螺旋pUC19 DNA解旋所需要的酶量。

储存

-20℃可保存3年。

使用注意事项

(1)1×vaccinia TOPOI Buffer:50mM Tris-acetate (pH 7.5), 100mM NaCl, 2.5mM MgCl2
(2)该酶的最佳反应温度为37℃。80℃ 20min可使该酶失活。
(3)该酶切割偶联试验时,识别位点[5’C(T)CCTT↓]的3’端碱基数量影响偶联效率。
(4)共价复合物进行DNA分子连接时,底物5’-端需要保留-OH基团。