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DNA/RNA 恒温扩增试剂-----防污染系统重磅上市!

LAMP技术学习资料
产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
A3824-02 Bst 4.0 Basic Mix (液体预混,可冻干) 100T(25μl体系) 1,650
A3828-02 Bst 4.0 Basic Bead(冻干球) 100T(25μl体系) 2,450
A3824-05A Bst 4.0 Basic Mix(with UDG) (防污染,可冻干) 新品! 100T(25ul体系) 2,450
A3824-05B 2000T(25μl体系) 32,500
 
A3824-03 Bst 4.0 SYBR Green Mix(液体预混,可冻干) 100T(25μl体系) 1,650
A3828-03 Bst 4.0 SYBR Green Bead(冻干球) 100T(25μl体系) 2,450
 
A3824-01 Bst 4.0 LowSalt Mix (液体预混,可冻干,无染料) 100T(25μl体系) 1,650
A3828-01 Bst 4.0 LowSalt Bead (冻干球,无染料) 100T(25μl体系) 2,450
A3824-01R Bst 4.0 LowSalt Red LyoMix (瓶装冻干,含红黄染料) 新品! 100T(25μl体系) 1,750
A3828-01R Bst 4.0 LowSalt Red Bead (冻干球,含红黄染料) 100T(25μl体系) 2,450
 
A3824-04 Bst 4.0 HNB LyoMix (瓶装冻干,含HNB染料) 新品! 100T(25μl体系) 1,750
A3828-04 Bst 4.0 HNB Bead (冻干球,含HNB染料) 新品! 100T(25μl体系) 2,450
特别说明 (1)鉴于特殊的产品工艺,HaiGene恒温扩增Mix及冻干品,全系列均不能进行浊度分析,需要浊度分析的实验,请选用单酶系列进行实验。任何其它来信咨询均不再做说明与回复。
(2)关于液体Mix、LyoMix、Bead的说明:液体Mix包含LAMP扩增全组分试剂,并且含有冻干赋形剂,可直接用于冻干实验,无需再加入任何其它赋形剂。LyoMix为其冻干形态,冻干于西林瓶中,其溶解后使用,但不可再次冻干。Bead为冻干单球(25 μl体系/球),其冻干于西林瓶中(100球/瓶)或(2000球/瓶)。
(3)全新的生产工艺及配方,确保产品室温(25℃)条件下稳定保存>6个月,在45℃条件下稳定保存>28天。
(4)大规格采购(>1万次)冻干微球及相应制品,询价!
(5)订制生产特殊冻干品,询价!
 
可用于恒温扩增可视化检测的辅助化学品试剂
A3828-21 OG 橙绿变色管(用于橙绿变色) 96支(25μl体系) 750
A3828-23 10x红色pH指示染料(可用于红黄变色) 500T(25μl体系) 询价
HaiGene开发的扩增特异性高、速度快、灵敏度高的引物组,可用于性能比对和对照测试
LP1002 COVID 19-ORF1ab LAMP Primer Set
(扩增特异性高、速度快、灵敏度高的引物组)
50T(25μl体系) 500
在核酸分子的恒温扩增过程中,无论采用LAMP、CPA等扩增技术,这种高速度的扩增特性,均不可避免的引起假阳性扩增。这种假阳性的扩增情况在LAMP扩增中表现尤为明显,由于LAMP扩增用到很高浓度的引物,因此难免保证有少量错配和引物Dimer,这些轻微的污染都会导致在LAMP高速扩增中造成假阳性。HaiGene优化的反应缓冲液,配合独有的显色技术和阴性控制技术建立的预混恒温mix系列产品,可高灵敏度、高特异性的用于LAMP pH变色、橙绿(OG)变色、HNB变色、SYBR Green荧光检测。在LAMP扩增实验中,与其它公司提供的LAMP Mix相比,得益于 Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶的出色性能,HaiGene的 Bst 4.0 Mix具有更快的扩增速度和杂质耐受性。

Bst 4.0 MasterMix及冻干微球系列特点

  SYBR Green HNB变色 基于pH指示变色 橙绿变色
检测方法 定量PCR或 恒温荧光仪 裸眼观察 裸眼观察 裸眼观察
显色染料 SYBR Green HNB染料 pH指示染料 OG染料
阳性判读方式 扩增曲线 天蓝色为阳性 黄色为阳性 绿色为阳性
反应时间 15-25min 20-35min 20-30min 15-25min
灵敏度(copies/test 5-25 copies 5-50 copies 5-50 copies 5-50 copies
抗杂质能力 对样本ph敏感
缓冲盐耐受性 非常低

恒温扩增使用策略及实例展示

1、Bst 4.0 Basic试剂
液体预混Bst 4.0 Basic Mix( A3824-02)和冻干球Bst 4.0 Basic Lyo Bead( A3828-02)试剂不包含任何显色染料,可自行搭配相关染料或检测手段进行LAMP反应,包括搭配OG染料管进行橙绿变色、搭配标记Oligo进行试纸条检测、搭配荧光染料进行荧光检测、搭配Molecular Beacon探针进行荧光检测等方法。
应用实例1: 在以A3824-02或 A3828-02搭配OG变色管( A3828-21)条件下,用 LP1002引物组进行COVID-19的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性极佳。以2019-nCoV体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
LAMP橙绿变色
2、Bst 4.0 Basic with UDG防污染试剂
LAMP是一种高速、高产核酸扩增法,通常会将目标产物放大10e10~12倍,微量的液体泄露和蒸发都可导致实验室污染,引起假阳性扩增。得益于HaiGene Bst4.0 DNA/RNA Pol识别dUTP底物的能力,使得防污染体系得以建立,并且维持了标准LAMP的扩增速度和灵敏度。HaiGene防污染恒温扩增试剂,在单管25 μl体系下,可以有效的去除十万copies(10e5)的污染物。本试剂可应用于荧光、核酸试纸条等核酸检测方法。
应用实例2: 以A3824-05为材料,加入荧光染料SYBR Green后,可用于荧光LAMP的检测。用 LP1004引物组进行COVID-19的污染物的LAMP测试,在采用防污染试剂后,10e5 copies污染模板无法检出。
LAMP防污染扩增
应用实例3:以A3824-05为材料,搭配核酸胶体金试纸条,用 LP1002修饰引物组(适用于核酸试纸条,HaiGene专有特异性控制技术)进行COVID-19的LAMP测试。以2019-nCoV体外转录RNA为模板,分别为10(阳性结果)、100(阳性结果)、1000 copies(阳性结果),NTC-ddH2O(阴性结果),10e5copies的dUTP污染物(阴性结果),65℃反应25min后点入试纸条。
LAMP试纸条检测
3、Bst 4.0 SYBR Green试剂
应用实例4:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行COVID-19的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以2019-nCoV体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
LAMP荧光扩增反应
4、Bst 4.0 LowSalt试剂
Bst 4.0 LowSalt试剂系列,包含极低浓度的缓冲盐。由于LAMP扩增中产生大量的H+导致反应完毕后的溶液pH由8.6-8.8下降到<7.2,因此可通过添加pH指示染料来进行样本的阳性扩增。 A3824-01和 A3828-01试剂中不含有任何染料,可用于自行添加染料,或用于其它pH检测系统的试剂开发。在搭配红色pH指示染料(A3828-23)的情况下,可进行红黄变色。
应用实例5:在以A3824-01或 A3828-01搭配红色pH指示染料(A3828-22)条件下, LAMP红黄变色反应用 LP1002引物组进行COVID-19的LAMP测试。以2019-nCoV体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6 Copies,NTC为ddH2O为模板。上图为加样结束反应起始前,下图为65℃反应30min 后。
LAMP红黄变色
5、Bst 4.0 HNB试剂
Bst 4.0 HNB试剂中包含了HNB染料, 在LAMP扩增起始前HNB染料与Mg2+结合表现出肉眼可见的紫罗兰色,当阳性扩增发生时Mg2+被LAMP反应的副产物焦磷酸螯合,HNB染料无法与Mg2+结合表现出肉眼可见的天蓝色。由此判断天蓝色为阳性扩增。该显色方法受样本缓冲盐、pH等影响较小,适用的样本较pH显色法通用性更强。
应用实例6:在以A3824-04或 A3828-04,用 LP1002引物组进行COVID-19的LAMP测试。以2019-nCoV体外转录RNA为模板,分别为1000、100、10Copies/管(3重复)和NTC(3重复)。下图为65℃反应30min后检测结果。