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超敏新冠D614G分型巢式荧光RT-PCR检测盒 ---HaiGene创新性技术

                                                                                             ——————速度、准确性、灵敏度绝佳的分型试剂
产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
A227019 超敏新冠D614G分型巢式荧光RT-PCR检测盒
(TaqMan One-Step Nested PCR法)
100T×25 µl 5500
新冠病毒(SARS-CoV-2)的刺突S蛋白是介导其进入宿主细胞的蛋白,也是疫苗和药物研发的主要靶标之一。新冠S蛋白发生在D614G(GAT→GGT)位置上的氨基酸残基突变可显著增强病毒的感染能力,D614G突变株较WT型感染力高约3.7至8.2倍,并且降低了病毒对患者恢复期血清的敏感性。因此流行毒株的分型检测对于疫情防控、疫苗效价评估显的尤为必要。该试剂盒采用HaiGene创新的巢式荧光RT-PCR技术(TaqMan One-Step Nested PCR),不仅能高灵敏度的检测病毒,还能准确分型感染的毒株。

技术指标

1.采用HaiGene创新的一步法巢式TaqMan RT-PCR技术,针对S基因D614G(GAT→GGT)设计SNP突变检测双探针,采用4引物扩增系统。
超敏双重非洲猪瘟巢式荧光PCR检测试剂盒设计策略
2.靶标序列:CACTTGAGATTCTTGACATTACACCATGTTCTTTTGGTGGTGTCAGTGTTATAACACCAGGAACAAATACTTCTAACCAGGTTGCTGTTCTTTATCAGG[A/G]
TGTTAACTGCACAGAAGTCCCTGTTGCTATTCATGCAGATCAACTTACTCCTACTTGGCGTGTTTATTCTACAGGTTCTAATGTTTTTCAAACACGTGCAGGC
TGTTTAATAGGGGCTGAACATGTCAACAACTCATATGAGTGTGACATACCCATTGGTGC
3. 以体外转录RNA为模板,D614和G614均可检测到10 copy/test(100%检出)。
4. 以体外转录RNA为模板,D614和G614分型 100%正确(10 copy/test)。
5. 人内参GADPH基因检测到0.05ng Total RNA水平。
6. 阴性样本在40Ct以内无起峰。
7. 标准定量PCR仪运行时间<60min。
8. 基因型:D614(野生型)FAM通道;G614(突变型)HEX通道;内参GAPDH(ROX通道)
注意:尽管该试剂盒性能出众,但该试剂盒仅供科学研究使用,该试剂盒未经临床样本测试,也未获得医药注册许可。

性能展示

1.对不同模板量RNA进行分型检测(10e1-10e5copy/test),均可检出,且分型100%正确。
一步巢式Taqman qPCR检测新冠病毒核酸D614G突变   一步巢式Taqman qPCR检测新冠病毒核酸D614G突变   一步巢式Taqman qPCR检测新冠病毒核酸D614G突变
图1A:2019-CoV病毒
D614G分型结果
  图1B:2019-CoV病毒D614(野生型)
灵敏度测试
  图1C:2019-CoV病毒G614(突变型)
灵敏度测试
2.通过扩增曲线判读阳性和基因型
一步巢式Taqman qPCR检测新冠病毒核酸D614G突变   一步巢式Taqman qPCR检测新冠病毒核酸D614G突变   一步巢式Taqman qPCR检测新冠病毒核酸D614G突变
图2A:2019-CoV  G614突变型毒株   图2B:2019-CoV D614野生型毒株   图2C:阴性样本