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C5051 Extreme Thermostable Rnase HII(极耐热Rnase HII)

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
C5051 Extreme Thermostable Rnase HII(极耐热Rnase HII) 200U 1,200  说明书
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Extreme Thermostable Rnase HII(极耐热Rnase HII)是一种来源于极端耐热的菌株的内源性核酸内切酶,它识别RNA/DNA 杂交链并切割RNA链,其对单链RNA切割活性极低,且对dsDNA、ssDNA无切割活性。该Rnase HII 酶在DNA/RNA duplex的单核糖核苷酸残基处从5’端进行切割,切割后产生一个5′ 端磷酸基团和一个 3′ 端羟基。该RNase HII 酶在 70-75°C 具有最佳活性,在 50°C 到 75°C 间均具有活性,但其在室温下活性非常低(活性降低 ~1000 倍)。该酶极度耐热,在95°C加热15min后仍保留全部活性,因此其与大多数的PCR缓冲体系兼容,可用于Rnase HII依赖性PCR(rhPCR)等实验。与Rnase HI 相比,Rnase HII可识别单个核糖核苷酸并进行切割,而Rnase HI识别四个连续核糖核苷酸的2'-OH;另外,Rnase HII可降解冈崎片段,而Rnase HI没有这个活性。

组分

名称 数量
ET Rnase HII (2U/μl) 100 μl

单位定义

一个单位是指在 70°C 下,在 10 mM Tris、50 mM NaCl、0.01% Triton X-100、10 µg/ml BSA、4 mM MgCl2 中,每分钟切割 1 nmol 含有单个 rC 的合成DNA/RNA杂交双链体底物所需的酶量。

应用

  • 减少或去除PCR反应中的引物二聚体
  • 提高多重PCR产物的准确性
  • 区分异种同源基因
  • SNP检测和稀有等位基因检测

储存

置于-20°C,可保存3年。

使用注意事项

1.该酶用于rhPCR(依赖于Rnase HII的PCR )时,需要使用 3′ 端带封闭基团的 DNA 引物。
2. 该酶在50-75℃均有活性,其用量可根据不同的应用进行调节。
3. 该酶与绝大多数的PCR缓冲体系兼容,对mg2+浓度要求也比较宽泛,在1~6 mM之间均可发挥活性。
4. 该酶极其耐热,95℃ 15min活性无显著降低,故不可通过热失活,0.1% SDS可将其失活。