8455新葡萄娱乐-澳门新葡8455手机版-首页

客户服务热线
400-0470-600

微信
13903605303

欢迎来到8455新葡萄娱乐官网~ 收藏本站 | 订单下载 | 联系我们
当前位置: 8455新葡京 >PCR产品专题 >PCR DNA聚合酶类>RAPA HiFi DNA Polymerase

产品中心

订购须知

邮箱:order@haigene.cn
电话:400-0470-600
传真:0451-58864810
订购:订单下载
QQ : 876341716

RAPA HiFi DNA Polymerase

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
A3201 RAPA HiFi DNA Polymerase 500U 1,500
RAPA HiFi DNA聚合酶,其来源于高保真DNA聚合酶,并加入了增强的延伸结构,使其具有超保真性能(~280倍Taq)、长片段扩增能力、高产量。长片段扩增能力,使用该酶可轻松扩增8kb的基因组DNA、20kb的λDNA、8kb的cDNA。该酶具有6kb/min以上的延伸速度。该酶具有5’-3’的聚合酶活性、强3’-5’的外切酶活性,产物为平末端。

主要特征

  • 超保真扩增:~280倍Taq的保真性能,是载体构建、点突变、NGS模板扩增、基因合成的最佳用酶。
  • 快速扩增:具有6kb/min的扩增能力。
  • 长片段扩增:质粒、λDNA 等简单模板可以有效扩增>20 kb,基因组可以有效扩增>8 kb,cDNA可以有效扩增>8kb。

组分

组分名称 500U
RAPA HiFi DNA Polymerase(5 U/μl) 100 μl
2xRAPA HiFi Buffer 1 ml×5

单位定义

一个活力单位即在在74°C条件下,30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

储存

长期储存置于-20°C以下,可保存2年;短期使用置于4°C(3个月)保存。

使用方法

1.按下表配制反应体系并混合均匀:
2xRAPA HiFi Buffer                                 12.5 μl
RAPA HiFi DNA Polymerase(5 U/μl)      0.25 μl
dNTP Mixture (10 mM each)                  0.25 μl
上游引物(10 μM)                                         1 μl
下游引物(10 μM)                                         1 μl
*模板DNA                                          1-250 ng
ddH2O                                           up to 25 μl
*模板DNA用量参数(25 μl反应体系,目的片段≤20kb)
     5-250 ng Genomic DNA
     0.1-10 ng Plasmid DNA
     1-2 μl cDNA from RT reaction
2. PCR扩增循环参数
(1)扩增片段<5kb时采用如下程序
循环数 温度 时间
1st Cycle 95°C 1min
25-35 Cyclese 95°C 30s
50~60°C 30s
72°C 6kb/min
Last Cycle 72°C 2min
(2)扩增片段>5kb时采用如下程序
循环数 温度 时间
1st Cycle 95°C 1min
25-35 Cyclese 95°C 30s
50~60°C 30s
72°C 2-3kb/min
Last Cycle 72°C 2min
3.注意事项
(1)当模板GC含量>65%时,请添加5×Q-Solution(Cat. No.: A3002)。
(2)当扩增片段<1kb时,延伸时间可直接使用15s,当扩增片段>5 kb时,按照2-3 kb/min的延伸时间进行设置,能获得更高的产量。
(3)由于不同的PCR管其导热性能有所不同,通常PCR采用25 μl体系可以获得更高的产量。