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Fast One-Step RNA TaqMan PCR Reagent(UNG)

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
A2304 5×Fast One-Step RNA Probe qPCR Mix (UNG) 250T/1000T×20 μl 750/2250

由于PCR对核酸的扩增效率极高,在诊断PCR实验中,非常容易造成移液器、台面、PCR仪、空气等气溶胶污染。当实验环境被污染后,会导致阴性样本的假阳性结果。在该Probe qPCR Mix中,将dNTP中的dTTP全部更换为dUTP,从而使得扩增后的PCR产物中包含dU碱基。在随后的实验中,含有气溶胶污染的dU PCR产物,将被本试剂中的UNG糖基化酶降解,从而去除了气溶胶的污染效应,本试剂中的UNG酶在37℃孵育2分钟,即可消除高达10万个Copy的核酸污染物。
5×Fast One-Step RNA Probe qPCR Mix(UNG)中的Fast Taq DNA聚合酶采用专有的热启动技术确保55℃以下没有任何活性,因此可在室温建立反应体系。Fast Taq DNA聚合酶具有卓越的扩增速度,因此满足快速PCR程序,通常在30min以内可以完成扩增反应。同时该聚合酶具有耐受杂质的能力,同样适用于粗制核酸样本的扩增反应。
5×Fast One-Step RNA Probe qPCR Mix(UNG)是以RNA为模板,进行一步法qPCR的专用试剂,它是一种将热启动Fast Taq DNA聚合酶、MLV反转录酶、Rnase Inhibitor、UNG酶、反应Buffer、dUTP/NTP Mixture等试剂预的5×浓度的单组分预混试剂。进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单,只需加入引物、探针、模板、水即可。该制品不含有ROX校正染料,适用于各种荧光标记探针,并且适用于各种定量PCR机型。

组分

名称 250T 1000T
5×Fast One-Step RNA Probe qPCR Mix(UNG) 1ml 1ml*4

主要特征

  • 热启动酶采用专有的修饰方式,30s热启动
  • 引入UNG,可高效消除气溶胶污染
  • 一步法RNA TaqMan qPCR单组份预混试剂
  • 卓越的扩增性能,耐受样本中的杂质能力强
  • 高灵敏度,可检测低丰度基因
  • 适用于所有实时定量PCR仪器

应用

RNA的相对定量检测。

注意事项

储存

1. 长期保存,请避光置于-20℃或-70℃可保存3年。
2. 经常使用,融化后可置于4℃,可保存1年。

反应实例

以人MCF7细胞提取的总RNA(1.28 pg-20 ng)为模板,应用5xFast One-Step RNA Probe qPCR Mix直接进行qPCR,扩增结果如图A: 扩增曲线;B:测试UNG去除DNA污染的能力。向反应体系中加入含dUTP的PCR产物,分别用普通Fast One-Step RNA Probe qPCR Mix(B1)和Fast One-Step RNA Probe qPCR Mix(UNG)(B2)进行定量PCRC:标准曲线。1-8RNA模板分别为:20 ng、4 ng、0.8 ng、0.16 ng、0.032 ng、6.4 pg、1.28pg和H2O。