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T7 ARCA加帽加尾 mRNA合成试剂盒

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
D0603 T7 ARCA加帽加尾 mRNA合成试剂盒 10T 2,000
50T 7,500
大多数真核mRNA的高效翻译需要在5’末端有一个7-甲基鸟苷帽结构、3’末端有一个Poly(A)尾。T7 ARCA加帽加尾RNA合成试剂盒可以快速的体外合成带帽带尾的mRNA。T7 RNA聚合酶通过转录,将抗-反向帽类似物(ARCA)加到mRNA上。经DNase I短暂温育可以去除模板DNA,并在Poly(A)聚合酶的作用下,为加帽的mRNA加Poly(A)尾。利用该试剂盒得到的RNA适用于多种下游应用,如RNA结构和功能研究、核酸酶生物化学研究、RNase保护分析探针、印迹杂交、反义RNA及RNAi实验、微阵列分析、显微注射、体外翻译和RNA疫苗等。
T7 RNA聚合酶识别T7 promoter(TTCTAATACGA CTCACTATAGG)以-2位G碱基为起点开始转录,该试剂盒可以从少量样本得到高效转录,单次反应可获得>30 μg的mRNA产物,转录长度可达4000nt以上。转录产物80%以上含有7-甲基鸟苷帽结构、Poly(A)尾长度>80nt。

组份

名称 10T 50T
5×ARCA/NTP mix 40 μl 200 μl
5×T7 RNA Pol Buffer 40 μl 200 μl
T7 ARCA Enzyme Mix 40 μl 200 μl
10×EPAP Reaction Buffer 1 ml 1 ml
Poly(A) Polymerase 50 μl 250 μl
RNase Free DNase I 20 μl 100 μl
RNase Free H2O 1 ml 1 ml

原理

T7 ARCA加帽加尾 mRNA合成试剂盒

储存

-20℃可保存2年,避免反复冻融。

实例

T7 ARCA加帽加尾mRNA合成试剂盒
以PCR产物作为模板进行体外转录获得的RNA,应用HaiGene T7 ARCA加帽加尾mRNA合成试剂盒进行加帽加尾,如图:泳道1为体外转录获得的RNA,泳道2为加帽加尾后产物。