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T4 RNA连接酶2

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
D2704 T4 RNA 连接酶2(K227Q) 4000U 450
20KU 1,500
截短型T4 RNA连接酶2为T4 RNA连接酶2的突变体,能特异性将5’末端预腺苷化的DNA或RNA连接到RNA的3’ OH末端。与野生型与T4 RNA连接酶2相比,截短型T4 RNA连接酶2催化的的连接反应无需ATP,但需预腺苷化接头,这样连接反应的背景最大程度的降低,同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性。该酶可用于二代测序small RNA 的文库构建,优化了接头的连接过程。 T4 RNA连接酶2

组分

组分名称 数量
T4 RNA Ligase2, truncated K227Q (200 U/μl) 20 μl/100 μl
10×T4 RNA Ligase Buffer 500 μl
50% PEG 8000 500 μl

应用

  • 将预腺苷化的DNA或RNA序列连接到任何RNA的3’末端
  • 将单链腺苷化引物连接至小RNA上,用于cDNA文库构建
  • 将单链腺苷化引物连接至RNA上,用于链特异性cDNA文库构建

活性定义

200单位指在标准反应体系,25℃反应条件下,1h能将80%的31-merRNA连接到预腺苷化的17-merDNA末端所需的酶量。

储存

-20℃可保存3年。

使用注意事项

1. 1× T4 RNA Ligase Buffer:50mM Tris-HCl pH 7.5,10mM MgCl2,1mM DTT。该酶反应时不需要ATP。
2. 最佳反应温度37℃,65℃ 10min可使该酶失活。
3. 该酶的连接接头需要5’-预腺苷化,不能连接磷酸化底物。
4. 该酶不能连接双链DNA或RNA。
5. 加入终浓度5~10% PEG 8000可提高连接效率。