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Taq DNA连接酶

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
D3002A Taq DNA 连接酶 1000U 400
D3002B 10KU 3,000
Taq DNA 连接酶是一种热稳定性连接酶,能够催化磷酸二酯键的形成,使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端通过磷酸二酯键相连。Taq DNA 连接酶催化的连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对,并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。在 45℃-65℃ 范围内,Taq DNA 连接酶均有活性。

组分

组分名称 数量
Taq DNA Ligase (40 U/μl) 25 μl/250 μl
10×HiFI Taq Ligase Buffer 250 μl/2.5 ml

应用

  • 双链DNA切刻的修复
  • 用于Gibson组装方法的建立

活性定义

1 单位指 50μl 反应体系中,45℃ 条件下,15 分钟内能使 50% 的1μg 经 BstEII 消化的 λDNA 片段(12 bp 粘性末端)发生连接所需要的酶量。

储存

-20℃可保存半年,长期储存请置于 -70℃。

1× Taq DNA 连接酶反应缓冲液

20 mM Tris-HCl(pH 7.6),25 mM KAc,10 mM Mg(Ac)2,10 mM DTT,1 mM NAD 和 0.1% Triton X-100,45℃ 温育。 该酶需 NAD+ 作辅因子,在 10× Taq DNA 连接酶缓冲液中已添加 NAD+;为了延长 NAD+ 的半衰期,缓冲液应于 -70℃ 贮存。