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RTS Arctic(DE3)感受态细胞

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
K0003 RTS BL21(DE3) Chaprone感受态细胞 10T 800
K0004 RTS Arctic(DE3)感受态细胞 10T 500
K0005 RTS BL21(DE3)plysS感受态细胞 10T 500
K0006 RTS Rosetta2(DE3)感受态细胞 10T 500
K0007 RTS OrigamiB(DE3)感受态细胞 10T 500
K0008 RTS BL21-Codonplus-RIPL 感受态细胞 10T 500
K0009 RTS SHuffle T7 E.coli 感受态细胞 10T 500
K0010 RTS BL21(DE3)感受态细胞 10T 500
RTS(Room Temperature Stable)系列感受态细胞为HaiGene独有的化学感受态专利技术制备,其室温可保存7天、-20°C可保存2年(推荐保存温度)、-80°C可长期保存性能无下降。运输过程中无需干冰,可常规冰袋运输(推荐运输温度)。RTS表达感受态细胞均为热激感受态细胞,转用于蛋白表达(不可用于克隆和载体构建),经42°C热激1min可获得105~106cfu/μg效价,可满足质粒转化要求。该制品使用简单、运输、储存方便。

组分

组分名称 数量
RTS Competent Cell(10T) 1瓶
Nano E.coli Transfection Reagent 1 ml

储存

RTS系列感受态为干粉形式,均可室温保存3天,长期保存-20°C(2年)。经Nano E.coli Transfection Reagent溶解后的感受态必须分装后,并于-60°C以下保存。溶解后的感受态细胞避免反复冻融,在-60°C以下可保存6个月。

使用方法

1. 从-20°C冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent彻底融化,放置于冰上。
注意:该试剂含长链带电化合物,允许反复冻融20次,使用完毕后继续-20°C保存。
2. 取50 μl Nano E.coli Transfection Reagent置于0.2 ml EP管中,加入10~100 ng质粒DNA(不可使用连接产物),枪头吹打混合均匀,冰上放置2min。
注意:放置时间不要超过30min,过长时间会导致核酸聚合,从而影响转化效价。
3. 将上述混合物(50 μl Nano E.coli Transfection Reagent和质粒DNA)加入到一支RTS表达感受态细胞干粉中,枪头轻轻吹打,彻底溶解细胞干粉,置于冰上15min。
注意:使用RTS 表达感受态细胞干粉前,轻甩干粉至管底部,如果发现干粉已经溶解则不可使用。
4. 置于42°C热激1min后,迅速置于冰上急冷2min。
5. 将热激完毕的感受态细胞转移到含有450 μl不含抗生素的SOC(或LB)培养基,37°C振荡(225 rpm)培养60min。使质粒上抗性标记基因表达,菌体复苏。
6. 取200 μl复苏菌液涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。
7. 将平板置于37°C培养,12~18小时后可出现菌落。
8. 获得的表达菌,可使用IPTG进行诱导表达,从而获得重组蛋白。