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LAMP引物

产品编号 产品名称 规格 价格(元)
A4401 LAMP引物 4 OD×6 400
环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),依赖于识别保守序列DNA的6个特异性片段的4条引物(2条外引物和2条内引物)和一种链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)。反应体系一般包括4条引物、Bst DNA聚合酶缓冲液、具有链置换特性的Bst DNA聚合酶、dNTP、模板DNA、甜菜碱、Mg2SO4等。LAMP检测体系中基因的扩增和产物的检测可一步完成,扩增效率高,可在30~60min扩增109~1010倍,特异性较高。2002年Nagamine通过增加LoopF和LoopB两条引物,使得等温扩增的速度显著加快(可在10~15min内完成检测),并大大提高了检测效率(高出7个数量级)。
因此,目前LAMP扩增实验中以6条引物组合为主,分别是F3、B3、FIP(F1c+F2)、BIP(B1c+B2)、LoopF、LoopB,灵敏度要求不高的仍然可采用无LoopF/B的四引物组合。

制品内容

使用专业的LAMP Designer引物设计引物设计如下六条引物。
Name Primer(5’-3’) OD数
F3 ACAGAAATGGCCTTGTGAAA 1
B3 CATATCCAGGCTGTGTCG 1
FIP TATACGTGAATGTGGCCTGTGCAGCCGAGGAAGAACTATGA 1
BIP ACCAACAGTAACCAACCTCAGTGGGTGAGGAATGGGTTCAC 1
LoopF GCAATACCTTCCATGTTGCAGAC 1
LoopB CTATGACCTGCTTGGTGCTGATT 1
RnaseFree TE引物稀释液   2 ml
注意:LAMP技术存在一定比例的非特异性扩增,因此不能保证每组引物100%的理想扩增,有时需要多套进行筛选。

储存

引物干粉于室温保存3个月,稀释后引物-20℃可保存1年。

10XLAMP引物工作液的配制

Name 储液浓度 10XLAMP引物 10XLAMP引物终浓度
F3 100 µM 2 µl 2 µM
B3 100 µM 2 µl 2 µM
FIP 100 µM 16 µl 16 µM
BIP 100 µM 16 µl 16 µM
LoopF 100 µM 4 µl 4 µM
LoopB 100 µM 4 µl 4 µM
RnaseFree TE   56 µl  
Total   100 µl