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2×RAPA HiFi PCR Mix
----超保真、长片段扩增、快速扩增

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
A0604A 2XRAPA HiFi PCR Mix 1 ml 320
A0604B 10 ml 2650
A0605A 2XRAPA HiFi PCR Mix(with dye) 1 ml 320
A0605B 10 ml 2650
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A0608 RAPA3G植物组织直扩PCR试剂盒 80T(50 μl 体系) 750
A0609 RAPA3G动物组织直扩PCR试剂盒 80T(50 μl 体系) 750
A3002 5×Q-Solution 1 ml 200
RAPA HiFi DNA聚合酶其来源于高保真DNA聚合酶,并加入了Sso7d延伸结合域,能够提高反应速度、保真度和稳定性。该HiFi PCR Mix为单酶制品,不含其它DNA聚合酶,具有超保真扩增性能(~280倍Taq)、长片段扩增能力、高产量等优势。RAPA HiFi DNA聚合酶在保真性方面与Q5 DNA聚合酶相似,在优化的反应缓冲液中,RAPA HiFi PCR Mix在长片段扩增、产量、成功率方面要超过Q5 PCR Mix。使用该酶可轻松扩增8kb的基因组片段,20kb的λ DNA,8kb的cDNA。RAPA HiFi DNA聚合酶具有6kb/min以上的扩增速度。对于常规或GC含量≤ 65%的复杂模板,使用该制品可以进行可靠的、超强的扩增。对于高GC含量的模板(>65%),添加5×Q-Solution(Cat. No.: A3002)确保最大的扩增性能。该HiFi PCR Mix具有5'-3'的聚合酶活性、3'-5'的强外切酶活性,产物为平末端。

特征

  • 超保真扩增:~280倍Taq的保真性能,是载体构建、点突变、NGS模板扩增、基因合成的最佳用酶。
  • 快速扩增:具有6kb/min的扩增能力。
  • 长片段扩增:质粒、λ DNA 等简单模板可以有效扩增>20 kb,基因组可以有效扩增>8 kb,cDNA可以有效扩增>8kb。
  • 储存

    长期储存置于-20°C以下,可保存2年,避免反复冻融;短期使用置于4°C(3个月)保存,一经融化后请放置于4°C,勿再冻存。

    反应实例

    1. 长片段扩增能力
    分别以λDNA、human gDNA、human cDNA为模板,使用RAPA HIFI PCR Mix进行扩增,循环数统一为28 cycles,结果如上图所示,对于不同种类DNA模板的长片段靶基因,RAPA HIFI PCR Mix均有良好的扩增性能。

    常见问题及解决方案:

    无扩增或产量低 循环数
    退火温度
    模板DNA纯度和用量
    延伸时间
    引物用量
    引物设计
    增加循环数至35~40cycles
    以2℃为单位降低退火温度
    使用高纯度的模板DNA,使用合适的模板量。
    适当增加延伸时间
    在0.1μM~0.5μM之间选取合适的引物量
    重新设计优化引物
    出现杂带或Smear 退火温度
    引物浓度
    循环数
    模板DNA使用量
    引物

    以2℃为单位提高退火温度
    降低引物浓度至0.2μM
    降低循环数至25~28cycles
    使用合适的模板量,不要过多使用
    重新设计优化引物