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T7 核酸内切酶I

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
C5025 T7 核酸内切酶I 250U 400 T7核酸外切酶I说明书
2500U 2500
T7 核酸内切酶I识别并切割不完全配对 DNA、十字型结构 DNA、Holliday 结构或交叉 DNA、异源双链 DNA 或者以更慢的速度切割含切刻的双链 DNA。T7核酸内切酶I切割错配碱基 5´ 端的第一、第二或第三个磷酸二酯。本产品是通过克隆重组表达T7核酸内切酶I基因,获得的高纯度蛋白,该酶无其他内切酶或外切酶污染。

组分

名称 数量
T7 Endonuclease I (10 U/μl) 25 μl/250 μl
10X T7 Endonuclease I Buffer 1 ml/1 mlx5

单位定义

在 50 μl 反应体系,37℃ 条件下,1 小时将 90% 以上的 1 μg 超螺旋十字型结构的 pUC(AT)* 转化成 90% 以上的线性结构所需要的酶量定义为一个活性单位。

应用

  • 基因突变、SNP、TALEN或CRISPR/Cas9形成的突变体检测
  • 识别错配 DNA
  • 分解四方向交叉 DNA 或分支 DNA
  • 检测或切割异源二聚体 DNA 和切刻 DNA
  • 随机切割线性 DNA 进行 shot-gun 克隆
  • 1X T7 Endonuclease I Buffer

    50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2 ,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃)。

    酶保存液

    50 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, pH 7.5。

    储存

    置于-20°C,可保存2年,避免反复冻融。

    注意事项

    (1) T7 核酸内切酶 I 是一种具有底物结构选择性的酶;该酶以不同的活性作用于不同的 DNA 底物。切割特定底物,必须控制酶量和反应时间。
    (2)反应温度超过42℃时,会增加非特异性核酸酶活性。